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當(dāng)前位置:生物測試 ?  蛋白組學(xué)平臺(tái) ? 

PRM定量蛋白質(zhì)組學(xué)

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PRM定量蛋白質(zhì)組學(xué)

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項(xiàng)目介紹

      PRM(平行反應(yīng)監(jiān)視,parallel reaction monitoring)是一種基于高分辨、高精度質(zhì)譜的離子監(jiān)視技術(shù),是對傳統(tǒng)質(zhì)譜定量技術(shù)SRM/MRM的升級(jí)版,該技術(shù)能夠?qū)δ繕?biāo)蛋白質(zhì)、目標(biāo)肽段(如發(fā)生翻譯后修飾的肽段)進(jìn)行選擇性檢測,從而實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)蛋白質(zhì)/肽段進(jìn)行絕對定量。

      PRM技術(shù)基于高分辨、高精度質(zhì)譜(如Orbitrap系列),首先利用四級(jí)桿質(zhì)量分析器的選擇檢測能力,在一級(jí)質(zhì)譜中(Q1)選擇性地檢測目標(biāo)肽段的母離子信息;隨后在collision cell中對母離子進(jìn)行碎裂;最后利用高分辨、高質(zhì)量精度分析器在二級(jí)質(zhì)譜中檢測所選擇的母離子窗口內(nèi)的所有碎片的信息。這樣即可對復(fù)雜樣本中的目標(biāo)蛋白質(zhì)/肽段進(jìn)行準(zhǔn)確地特異性分析。

技術(shù)特點(diǎn)

     相比于傳統(tǒng)的SRM/MRM技術(shù),PRM技術(shù)將采集二級(jí)信息所用的四級(jí)桿質(zhì)量分析器替換為更高分辨、更高質(zhì)量精度的分析器,實(shí)現(xiàn)了從目標(biāo)離子對檢測到全部目標(biāo)離子碎片檢測的轉(zhuǎn)化。因此,PRM技術(shù)不僅具有SRM/MRM的靶向定量分析能力,還同時(shí)具備了定性能力。

其在定量分析中的優(yōu)勢還體現(xiàn)在:

1、質(zhì)量精度達(dá)到ppm級(jí),能夠比SRM/MRM更好地排除背景干擾和假陽性,有效提高復(fù)雜背景下的檢測限和靈敏度;

2、對子離子進(jìn)行全掃描,無需選擇離子對和優(yōu)化碎裂能量,更容易進(jìn)行方法學(xué)建立;

3、更寬的線性范圍:增加至5-6個(gè)數(shù)量級(jí)。  

PRM應(yīng)用范圍:      

1、可以對iTRAQ/TMT標(biāo)記定量差異蛋白進(jìn)行驗(yàn)證;

2、可以對LFQ非標(biāo)定量差異蛋白進(jìn)行驗(yàn)證;

3、可以對肽段和蛋白質(zhì)進(jìn)行絕對定量分析;

4、可以對已經(jīng)建立或?qū)ふ业降腂iomarker蛋白進(jìn)行定量分析;

5、可以特異性地對蛋白的修飾位點(diǎn)(磷酸化、乙?;龋┻M(jìn)行定量分析;

6、可以特異性地某通路蛋白進(jìn)行定量分析  。

樣品要求

送樣前請聯(lián)系技術(shù)經(jīng)理具體溝通。

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PRM定量蛋白質(zhì)組學(xué)

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